Leiomyoma and leiomyosarcoma two different pathologies with the same origin: identification of a possible new marker and therapeutic target through characterization of Raf kinase inhibitor protein (RKIP)

Malign leiomyosarcoma and benign leiomyoma represent the two counterparts of the myometrium transformation. Nevertheless, the differential diagnosis to discriminate benign from malign lesions represents a remarkable problem. So, it is important to identify new markers making the differential diagnosis more accurate. The pleiotropic RKIP role on leiomyosarcoma is still unclear. In this study, the tendency of five different histological variants of benign lesions to be positive for RKIP and, conversely, the tendency of malign lesions to be negative for RKIP were found by immunohistochemistry. This was particularly evident comparing the malign leiomyosarcoma to the leiomyoma with bizarre nuclei that, although benign, shows intermediate features between benign lesions and malign ones. To understand if RKIP plays a biological role in leiomyosarcoma, in vitro knockout of RKIP and in vitro overexpression of RKIP in leiomyosarcoma cells were performed. It was found that about cells viability overtime and migratory capability both RKIP knockout cells and RKIP overexpressing cells show a trend similar to that of their respective negative controls. On the other hand, it was observed that RKIP knockout cells show a greater ability to form colonies when compared with negative control where the expression of RKIP was not modified. In conclusion, the obtained results suggest that there could be a RKIP loss in the malign leiomyosarcoma and this may favor the clonogenicity. Altogether these results suggest that RKIP may be a candidate to be considered as an additional marker for the differential analysis to discriminate if a preparation similar to the benign leiomyoma with bizarre nuclei, is not, actually a malign lesion. In light of the rarity of the studied pathologies, these results constitute a starting point for further researches in order to consider RKIP a reliable marker in all respects.

Leiomiosarcoma maligno e leiomioma benigno rappresentano le due controparti della trasformazione del miometrio. Tuttavia la diagnosi differenziale per discriminare tra lesioni benigne e maligne rappresenta un grande problema. Così vanno identificati nuovi markers per rendere la diagnosi differenziale piu’ accurata. Il ruolo pleiotropico dell’RKIP nel leiomiosarcoma non è ancora chiaro. In questa tesi tramite l’immunoistochimica si sono riscontrate la tendenza di cinque diverse varianti istologiche di lesioni benigne a essere positive all’RKIP e, al contrario, la tendenza delle lesioni maligne a essere negative all’RKIP. Ciò è stato molto evidente confrontando leiomiosarcoma maligno e leiomioma con nuclei bizzarri che, sebbene benigno, ha caratteristiche intermedie tra lesioni benigne e maligne. Per capire se l’RKIP ha un ruolo biologico nel leiomiosarcoma, sono stati eseguiti il knockout in vitro dell’RKIP e l’overespressione in vitro dell’RKIP nelle cellule di leiomiosarcoma. Si è visto che circa la vitalità delle cellule nel tempo e la capacità migratoria, sia le cellule RKIP knockout che le cellule che overesprimono RKIP hanno una tendenza simile a quella dei rispettivi controlli negativi. D'altra parte si è visto che le cellule RKIP knockout hanno una maggiore capacità di formare colonie rispetto al controllo negativo in cui l'espressione dell’RKIP non è stata modificata. In conclusione i risultati ottenuti suggeriscono che può esserci una perdita di RKIP nel leiomiosarcoma maligno e che ciò può favorire clonogenicità. Nel complesso questi risultati suggeriscono che l’RKIP potrebbe candidarsi come marker addizionale per l'analisi differenziale per discriminare se una preparazione simile al leiomioma benigno con nuclei bizzarri non sia, in realtà, una lesione maligna. Alla luce della rarità delle patologie studiate questi risultati costituiscono un punto di partenza per ulteriori ricerche per considerare l’RKIP un marker affidabile a tutti gli effetti.