Nicotinamide N-methyltransferase (NNMT) plays a crucial role in cancer metabolism and it was found to be overexpressed in several neoplasms. However, to date no data are available on its expression in skin cancers, which represent a global health problem. The most common forms of non-melanoma skin cancers (NMSCs) are squamous and basal cell carcinoma (SCC and BCC, respectively). As regards melanoma, despite its low incidence, it is responsible for most of skin cancer deaths. The identification of prognostic factors is therefore of primary importance. The evaluation of NNMT expression in skin cancers was assessed by immunohistochemistry. The enzyme was found to be overexpressed in BCC, while in SCC its levels were lower than in the surrounding healthy tissue. Moreover, NNMT expression was decreased in aggressive forms compared to less aggressive ones, both for BCC and SCC. The differences in enzyme dysregulation might depend on the fact that BCC and SCC arise from keratinocytes of different epidermal layers. Melanoma samples showed a higher NNMT immunoexpression than nevi and the enzyme levels were inversely associated with important clinicopathological parameters, thus suggesting that NNMT could represent a potential diagnostic and prognostic biomarker for melanoma. To better understand the role played by NNMT in melanoma cell metabolism, the effect of its knockdown was analysed in A375 cell line. After the assessment of enzyme silencing efficiency by Real-Time PCR and Western blot, the impact of NNMT downregulation on cell proliferation and migration was evaluated by means of by MTT and wound healing assays, respectively. The analyses were performed also on cells treated with the chemotherapy drug dacarbazine. Besides showing an inhibition of proliferation and migration, NNMT-silenced cells displayed a higher sensitivity to the chemotherapeutic treatment with respect to controls. NNMT may therefore be proposed as a novel target for melanoma treatment.

La nicotinamide N-metiltrasferasi (NNMT) svolge un ruolo cruciale nel metabolismo tumorale. L’enzima risulta overespresso in varie neoplasie ma in letteratura non ci sono dati riguardanti la sua espressione nei tumori cutanei, che rappresentano un problema di salute globale. I più comuni tumori cutanei non-melanomatosi (NMSC) sono il carcinoma squamocellulare (SCC) e il basocellulare (BCC). Il melanoma invece ha una bassa incidenza ma un alto tasso di mortalità. L’identificazione di fattori prognostici è perciò di primaria importanza. L’espressione dell’NNMT in questi tumori è stata valutata mediante immunoistochimica. L’enzima è risultato overespresso nei BCC e downregolato negli SCC. I risultati mostrano inoltre una riduzione della sua espressione nelle varianti più aggressive dei BCC e degli SCC. Tali differenze nella disregolazione dell’enzima potrebbero dipendere dal fatto che tali neoplasie hanno origine a partire da cheratinociti appartenenti a strati epidermici diversi. I livelli di NNMT sono inoltre più elevati nel melanoma rispetto ai nevi e sono inversamente associati ad importanti parametri clinicopatologici, suggerendo che l’NNMT potrebbe rappresentare un nuovo marcatore diagnostico e prognostico per il melanoma. Per meglio comprendere il ruolo svolto dall’NNMT nel metabolismo delle cellule di melanoma, è stato valutato l’effetto del suo knockdown nella linea cellulare A375. Dopo aver verificato il silenziamento, è stato osservato l’effetto della downregolazione sulla proliferazione e migrazione cellulare mediante saggio MTT e wound healing assay. Le analisi sono state effettuate anche sulle cellule trattate con il chemioterapico dacarbazina. Oltre a mostrare un’inibizione della proliferazione e della migrazione cellulare, le cellule silenziate sono risultate essere maggiormente sensibili al trattamento chemioterapico rispetto ai controlli. L’NNMT può quindi essere proposto come nuovo target per il trattamento del melanoma.

Exploring the role of nicotinamide n-methyltransferase in skin cancers: analyses performed on tissue samples and cell culures / Pompei, Veronica. - (2021 Mar 08).

Exploring the role of nicotinamide n-methyltransferase in skin cancers: analyses performed on tissue samples and cell culures

POMPEI, VERONICA
2021-03-08

Abstract

Nicotinamide N-methyltransferase (NNMT) plays a crucial role in cancer metabolism and it was found to be overexpressed in several neoplasms. However, to date no data are available on its expression in skin cancers, which represent a global health problem. The most common forms of non-melanoma skin cancers (NMSCs) are squamous and basal cell carcinoma (SCC and BCC, respectively). As regards melanoma, despite its low incidence, it is responsible for most of skin cancer deaths. The identification of prognostic factors is therefore of primary importance. The evaluation of NNMT expression in skin cancers was assessed by immunohistochemistry. The enzyme was found to be overexpressed in BCC, while in SCC its levels were lower than in the surrounding healthy tissue. Moreover, NNMT expression was decreased in aggressive forms compared to less aggressive ones, both for BCC and SCC. The differences in enzyme dysregulation might depend on the fact that BCC and SCC arise from keratinocytes of different epidermal layers. Melanoma samples showed a higher NNMT immunoexpression than nevi and the enzyme levels were inversely associated with important clinicopathological parameters, thus suggesting that NNMT could represent a potential diagnostic and prognostic biomarker for melanoma. To better understand the role played by NNMT in melanoma cell metabolism, the effect of its knockdown was analysed in A375 cell line. After the assessment of enzyme silencing efficiency by Real-Time PCR and Western blot, the impact of NNMT downregulation on cell proliferation and migration was evaluated by means of by MTT and wound healing assays, respectively. The analyses were performed also on cells treated with the chemotherapy drug dacarbazine. Besides showing an inhibition of proliferation and migration, NNMT-silenced cells displayed a higher sensitivity to the chemotherapeutic treatment with respect to controls. NNMT may therefore be proposed as a novel target for melanoma treatment.
8-mar-2021
La nicotinamide N-metiltrasferasi (NNMT) svolge un ruolo cruciale nel metabolismo tumorale. L’enzima risulta overespresso in varie neoplasie ma in letteratura non ci sono dati riguardanti la sua espressione nei tumori cutanei, che rappresentano un problema di salute globale. I più comuni tumori cutanei non-melanomatosi (NMSC) sono il carcinoma squamocellulare (SCC) e il basocellulare (BCC). Il melanoma invece ha una bassa incidenza ma un alto tasso di mortalità. L’identificazione di fattori prognostici è perciò di primaria importanza. L’espressione dell’NNMT in questi tumori è stata valutata mediante immunoistochimica. L’enzima è risultato overespresso nei BCC e downregolato negli SCC. I risultati mostrano inoltre una riduzione della sua espressione nelle varianti più aggressive dei BCC e degli SCC. Tali differenze nella disregolazione dell’enzima potrebbero dipendere dal fatto che tali neoplasie hanno origine a partire da cheratinociti appartenenti a strati epidermici diversi. I livelli di NNMT sono inoltre più elevati nel melanoma rispetto ai nevi e sono inversamente associati ad importanti parametri clinicopatologici, suggerendo che l’NNMT potrebbe rappresentare un nuovo marcatore diagnostico e prognostico per il melanoma. Per meglio comprendere il ruolo svolto dall’NNMT nel metabolismo delle cellule di melanoma, è stato valutato l’effetto del suo knockdown nella linea cellulare A375. Dopo aver verificato il silenziamento, è stato osservato l’effetto della downregolazione sulla proliferazione e migrazione cellulare mediante saggio MTT e wound healing assay. Le analisi sono state effettuate anche sulle cellule trattate con il chemioterapico dacarbazina. Oltre a mostrare un’inibizione della proliferazione e della migrazione cellulare, le cellule silenziate sono risultate essere maggiormente sensibili al trattamento chemioterapico rispetto ai controlli. L’NNMT può quindi essere proposto come nuovo target per il trattamento del melanoma.
NICOTINAMIDE N-METHYLTRANSFERASE; SKIN CANCERS; IMMUNOHISTOCHEMISTRY;GENE SILENCING
CANCRO ALLA PELLE, SILENZIAMENTO GENETICO
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Utilizza questo identificativo per citare o creare un link a questo documento: https://hdl.handle.net/11566/287480
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