Role of phytochemicals with antioxidant and anti-inflammatory capacity in preventing photo-aging in human dermal fibroblasts Skin ageing is strictly connected to oxidative stress, reactive oxygen species (ROS) produced either from exogenous and endogenous sources are able to react and damage proteins, DNA and lipids of the cellular (fibroblast and keratinocyte) and extracellular matrix component of the skin underlying the typical sign of ageing in this tissue (wrinkles, sagging, hypersensitivity). UV radiation, among environmental factors, represent a major source of ROS, in particular UVA. In our study we tested innovative phytochemical substances with potential antioxidant and anti-inflammatory activities for their ability to prevent UV-mediated oxidative damage to fibroblasts . In particular we developed a model of UV photo-damaged fibroblast using a UVA source at 36 J/cm2 where isolated substances or mixes of those were used to evaluate through flow-cytometric techniques their ability in lowering ROS intracellular content triggered by UV irradiation. Moreover, antinflammatory effect of the same substances was also evaluated following LPS exposure (10 ng/ml for 3h) by quantifying the expression of pro-inflammatory cytokines (IL6, IL8, COX2 and MCP-1) in real time PCR. The study allowed the identification of a sub set of photostable compounds, biocompatible and their optimal range of concentrations in preventing UVA mediated damage. In particular the identification of most promising combinations represent a first step toward the development of novel formulation for the cosmetic industry. The project was supported by ACRAF Angelini SpA and Regione Marche within the EUREKA project.

Ruolo di composti fito-chimici ad azione antiossidante e antinfiammatoria in colture di fibroblasti del derma umano nella protezione dal foto-invecchiamento L’invecchiamento cutaneo è strettamente correlato allo stress ossidativo; le specie reattive dell’ossigeno (ROS) prodotti da vari stimoli esogeni e endogeni sono in grado di reagire e danneggiare le proteine, il DNA e i lipidi della componente cellulare (fibroblasti, cheratinociti) e della matrice extracellulare nella pelle. Tali danni radicalici sono alla base dei segni caratteristici dell’invecchiamento cutaneo come: rughe, cute lassa, e pelle sensibile. La radiazione UV rappresenta il principale fattori ambientali alla base della produzione di ROS, in particolare la radiazione UVA. Nel nostro lavoro testiamo materie prime innovative di natura fitochimica a potenziale attività antiossidante e anti-infiammatoria, contro il fotoinvecchiamento UVA-indotto nei fibroblasti. Lo studio ha previsto la realizzazione di un modello di fotoinvecchiamento dei fibroblasti irradiati con UVA (36 J/cm2) per valutare l’efficacia dei composti, singoli e in miscela, nel contrastare la formazione di ROS UVA-indotti impiegando sonde fluorescenti in associazione a metodologie citofluorimetriche. Inoltre è stato altresì valutato l’effetto anti-infiammatorio in seguito ad esposizione a LPS (10ng/ml per 3 h), tramite la valutazione dell’espressione di citochine proinfiammatorie (IL6, IL8, COX2 e MCP-1) in real time PCR. Lo studio ha consentito di identificare un sotto insieme di composti foto stabili, biocompatibili ed il loro range di concentrazione efficace nel prevenire il danno indotto da UVA ed in particolare le combinazioni più promettenti delle stesse per un futuro sviluppo di formulazioni di prodotti per l’industria cosmetica. Il progetto è stato supportato da ACRAF Angelini SpA e dalla Regione Marche nell’ambito del progetto EUREKA

Ruolo di composti fito-chimici ad azione antiossidante e antinfiammatoria in colture di fibroblasti del derma umano nella protezione dal foto-invecchiamento / Marcheggiani, Fabio. - (2017 Mar 22).

Ruolo di composti fito-chimici ad azione antiossidante e antinfiammatoria in colture di fibroblasti del derma umano nella protezione dal foto-invecchiamento

MARCHEGGIANI, FABIO
2017-03-22

Abstract

Role of phytochemicals with antioxidant and anti-inflammatory capacity in preventing photo-aging in human dermal fibroblasts Skin ageing is strictly connected to oxidative stress, reactive oxygen species (ROS) produced either from exogenous and endogenous sources are able to react and damage proteins, DNA and lipids of the cellular (fibroblast and keratinocyte) and extracellular matrix component of the skin underlying the typical sign of ageing in this tissue (wrinkles, sagging, hypersensitivity). UV radiation, among environmental factors, represent a major source of ROS, in particular UVA. In our study we tested innovative phytochemical substances with potential antioxidant and anti-inflammatory activities for their ability to prevent UV-mediated oxidative damage to fibroblasts . In particular we developed a model of UV photo-damaged fibroblast using a UVA source at 36 J/cm2 where isolated substances or mixes of those were used to evaluate through flow-cytometric techniques their ability in lowering ROS intracellular content triggered by UV irradiation. Moreover, antinflammatory effect of the same substances was also evaluated following LPS exposure (10 ng/ml for 3h) by quantifying the expression of pro-inflammatory cytokines (IL6, IL8, COX2 and MCP-1) in real time PCR. The study allowed the identification of a sub set of photostable compounds, biocompatible and their optimal range of concentrations in preventing UVA mediated damage. In particular the identification of most promising combinations represent a first step toward the development of novel formulation for the cosmetic industry. The project was supported by ACRAF Angelini SpA and Regione Marche within the EUREKA project.
22-mar-2017
Ruolo di composti fito-chimici ad azione antiossidante e antinfiammatoria in colture di fibroblasti del derma umano nella protezione dal foto-invecchiamento L’invecchiamento cutaneo è strettamente correlato allo stress ossidativo; le specie reattive dell’ossigeno (ROS) prodotti da vari stimoli esogeni e endogeni sono in grado di reagire e danneggiare le proteine, il DNA e i lipidi della componente cellulare (fibroblasti, cheratinociti) e della matrice extracellulare nella pelle. Tali danni radicalici sono alla base dei segni caratteristici dell’invecchiamento cutaneo come: rughe, cute lassa, e pelle sensibile. La radiazione UV rappresenta il principale fattori ambientali alla base della produzione di ROS, in particolare la radiazione UVA. Nel nostro lavoro testiamo materie prime innovative di natura fitochimica a potenziale attività antiossidante e anti-infiammatoria, contro il fotoinvecchiamento UVA-indotto nei fibroblasti. Lo studio ha previsto la realizzazione di un modello di fotoinvecchiamento dei fibroblasti irradiati con UVA (36 J/cm2) per valutare l’efficacia dei composti, singoli e in miscela, nel contrastare la formazione di ROS UVA-indotti impiegando sonde fluorescenti in associazione a metodologie citofluorimetriche. Inoltre è stato altresì valutato l’effetto anti-infiammatorio in seguito ad esposizione a LPS (10ng/ml per 3 h), tramite la valutazione dell’espressione di citochine proinfiammatorie (IL6, IL8, COX2 e MCP-1) in real time PCR. Lo studio ha consentito di identificare un sotto insieme di composti foto stabili, biocompatibili ed il loro range di concentrazione efficace nel prevenire il danno indotto da UVA ed in particolare le combinazioni più promettenti delle stesse per un futuro sviluppo di formulazioni di prodotti per l’industria cosmetica. Il progetto è stato supportato da ACRAF Angelini SpA e dalla Regione Marche nell’ambito del progetto EUREKA
photo-aging; fibroblasts; ROS; inflammation; combinations of substances
fotoinvecchiamento; fibroblasti; ROS; infiammazione; combinazioni sostanze
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Descrizione: tesi_marcheggiani
Tipologia: Tesi di dottorato
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