Caratterizzazione delle cellule che esprimono GAT-1, il principale trasportatore del gaba, nella sostanza bianca sottocorticale del ratto

CHARACTERIZATION OF CELLS EXPRESSING GAT-1, THE MOST IMPORTANT GABA TRANSPORTER, IN SUBCORTICAL WHITE MATTER OF THE RAT BRAIN. Bassi S1 , Fattorini G1 , Melone M1 , Conti F1,2 1Department of Experimental and Clinical Medicine, Section of Neuroscience and Cell Biology; 2 Foundation for Molecular Medicine, Università Politecnica delle Marche, Ancona GABA-mediated inhibition exerts a powerful control over neuronal activity. GABA transporters, especially GAT-1 that is the most important GABA transporter, contribute to modulate GABA’s action. Alterations of transporters activity or expression can have a crucial role in the pathophysiology of some diseases. Although GAT-1+ elements in subcortical white matter have been described, the distribution and nature of cellular elements expressing GAT-1 has never been investigated. We therefore studied systematically the distribution, number and nature of GAT-1+ cells in the subcortical white matter by light, electron and confocal microscopy. Light microscopy analysis of the subcortical white matter revealed the presence of numerous GAT-1 + cells. They showed different morphological features: some resembling neurons, other reminiscent of glial cell. Pre-embedding electron microscopy showed that GAT-1 immunoreactive neurons, astrocytes, oligodendrocytes (mature and immature) and microglia. To quantify GAT-1 expression in the different cell types, we studied double- labeled immunofluorescence series were used GAT-1/NeuN; GAT-1/GFAP; GAT-1/NG2; GAT-1/RIP and GAT-1/CD11b. Results showed that 30,65% of GAT-1+ cells in subcortical white matter express NeuN; 32,22% express GFAP; 11,75% express NG2; 14,78% express RIP and 20,48% CD11b. By showing that all cell types present in subcortical white matter express GAT-1, these observations indicate that GAT-1+ mediated GABA uptake may not be limited to regulating GABA levels at synapses.

CARATTERIZZAZIONE DELLE CELLULE CHE ESPRIMONO GAT-1, IL PRINCIPALE TRASPORTATORE DEL GABA, NELLA SOSTANZA BIANCA SOTTOCORTICALE DEL RATTO. Bassi S, Fattorini G, Melone M, Conti F 1Dipartimento di Medicina Sperimentale e Clinica, Sezione di Neuroscienze e Biologia Cellulare; 2 Foundazione per la Medicina Molecolare, Università Politecnica delle Marche, Ancona L’inibizione mediata dal GABA esercita un potente controllo sull’attività neuronale. I trasportatori del GABA, soprattutto GAT-1, che è il più importante, contribuiscono a modulare l'azione di questo neurotrasmettitore. L’alterazione dell’attività o dell’espressione dei trasportatori può avere un ruolo determinante nella fisiopatologia di alcune malattie. Sebbene gli elementi GAT-1 + nella sostanza bianca sottocorticale siano già stati descritti, non sono mai state studiate la distribuzione e la natura delle cellule che esprimono GAT-1. Abbiamo quindi studiato sistematicamente la distribuzione, il numero e la natura delle cellule GAT-1+ nella sostanza bianca sottocorticale attraverso microscopia ottica, elettronica e confocale. L’analisi al microscopio ottico della sostanza bianca sottocorticale ha rivelato la presenza di numerose cellule GAT-1 +. Queste hanno mostrato diverse caratteristiche morfologiche: alcune assomigliavano a neuroni, altre ricordavano cellule gliali. La microscopia elettronica pre-embedding ha mostrato l’immunoreattività di GAT-1 in neuroni, astrociti, oligodendrociti (maturi e immaturi) e microglia. Per quantificare GAT-1 nei diversi tipi cellulari, abbiamo studiato una serie di doppie marcature all’immunofluorescenza per le quali sono stati utilizzati GAT-1/NeuN; GAT-1/GFAP; GAT-1/NG2; GAT-1/RIP e GAT-1/CD11b. I risultati hanno mostrato che il 30,65% di cellule GAT-1 + nella sostanza bianca sottocorticale esprime NeuN; il 32,22% esprime GFAP; il 11,75% esprime NG2; il 14,78% esprime RIP e il 20,48% esprime CD11b. Considerando che tutti i tipi di cellule presenti nella sostanza bianca sottocorticale esprimono GAT-1, questa osservazione indica che la ri-captazione di GABA operata da GAT-1 potrebbe non limitarsi semplicemente alla regolazione dei livelli sinaptici di GABA.