MicroRNA come biomarcatori nella diagnosi e nella sorveglianza sanitaria delle malattie professionali: caso del mesotelioma maligno

The monitoring of the health of workers at risk is aimed at formulating a fitness certificate specific to their occupational task. Clinical examination is first performed in start-up and then subsequent periodic medical examinations are carry out according to risk. Therefore, the use of biomarkers that could determine the early stages of the disease may improve the assessment of risk to health and contribute to effective policies for preventing diseases caused by environmental and occupational exposures. Malignat pleural Mesothelioma (MPM) is well known to be linked to asbestos exposure at the workplace. Improved detection methods for diagnosis of this type of neoplastic disease are essential for an early and reliable detection and treatment. Thus, focus has been on finding tumour markers used for non-invasive detection of MPM. There is emerging evidence of abnormal levels of microRNAs (miRNAs) in tumours. While some miRNAs commonly exhibit altered amounts across tumours, often, different tumour types produce unique patterns of miRNAs, related to their tissue of origin. In this study, miRNA isolated from MM fresh-frozen biopsies was profiled for the expression of 88 miRNAs involved in cancer. MPM samples and normal tissues were analysed by quantitative reverse transcription-PCR miRNA array. A marked difference in miRNA expression pattern was observed between normal tissue and tumours. Most of miRNA were down-regulated in tumours, and among them 8 miRNA were significantly under expressed. Their down-regulation was more evident in advanced tumours. Three of these miRNAs (miRNA-335, miRNA-126, miRNA-32) were validated in the larger sample series, and only miR-126 showed significant differential expression, distinguish MPM samples from normal tissues and tumour staging. Furthermore, the performance of the miRNA-126 as biomarkers was evaluated in serum samples of asbestos-exposed subjects, MPM patients and compared with age-matched healthy subjects. The miRNA-126 significantly distinguish asbestos-exposed subjects and MPM patients from age-matched controls. We first identify a specific miRNA profile for MPM and we propose miRNA-126 as potential biomarker of exposure and for early diagnosis and prognosis of MPM.

La sorveglianza sanitaria sui lavoratori a rischio è finalizzata alla formulazione di un giudizio di idoneità specifico per la mansione svolta, attraverso un procedimento che comprenda l’esame clinico effettuato in fase di avviamento al lavoro, nonché accertamenti sanitari preventivi richiesti in base alla valutazione dei rischi. Per tale motivo, la validazione di biomarcatori come rilevatori precoci della patologia potrebbe migliorare la valutazione del rischio per la salute e contribuire a politiche efficaci per la prevenzione di malattie causate da esposizioni ambientali e/o professionali. Il Mesotelioma Maligno della Pleura (MPM) è un tumore strettamente legato all’esposizione professionale all’asbesto. Migliorare le tecniche per la diagnosi è essenziale per una diagnosi precoce e per il trattamento terapeutico, per cui esiste la reale necessità di identificare marcatori tumorali che possano essere utilizzati per una diagnosi non invasiva del MPM. Livelli anomali di microRNAs (miRNA) sono stati ritrovati in molti tipi di cancro. La loro de-regolazione è associabile a diversi tipi di tumori, quindi il profilo di espressione dei miRNA può identificare una neoplasia. L’obiettivo di questo studio è investigare le potenzialità dei miRNA come biomarcatori di esposizione,diagnosi precoce e prognosi. A questo scopo, è stato analizzato il profilo di espressione di 88 miRNA coinvolti nel cancro estratti da biopsie di tessuto fresco. I campioni di MPM e quelli di controllo sono stati analizzati tramite qRT-PCR che ha rilevato una marcata differenza nel profilo di espressione dei miRNA tra tessuto patologico e sano. La maggior parte dei miRNA sono risultati sottoespressi ed in particolare 8 miRNA sottoregolati sono risultati statisticamente significativi. La loro de-regolazione risulta più evidente nel tumore allo stadio avanzato. Tre fra i miRNA significativi (miRNA-335, miRNA-126 emiRNA-32) sono stati confermati in un numero maggiore di campioni paraffinati; solo il miRNA-126 ha mantenuto una de-regolazione significativa e la capacità di discriminare il tessuto normale dal patologico e la stadiazione del tumore. La performance del miRNA-126 come biomarker è stata valutata anche in campioni di siero di soggetti ex-esposti all’amianto e soggetti con MPM e comparata con soggetti di controllo. Il miRNA-126 discrimina significativamente soggetti ex-esposti e soggetti affetti da MPM dai controlli. Pertanto in questo lavoro è stato identificato uno specifico profilo di espressione dei miRNA per il MPM ed è stato proposto il miRNA-126 come potenziale biomarker di esposizione e di diagnosi precoce del MPM.